Построен в 1834 г. при настоятеле монастыря архимандрите Порфирии (Успенском) на пожертвованные средства одесской купчихи Дарии Харламбу. Вначале храм был освящен в честь иконы Богоматери – Живоносный Источник, но с 1936 г., после разрушения большевиками Успенского собора монастыря, храм до настоящего времени носит наименование "Успенский". В 1922 году монастырь был закрыт, а в 1944 году началось его возрождение. В настоящее время в храме почивают мощи преп. Кукши Одесского, находится чудотворная афонская икона Богоматери – Млекопитательница и левая стопа апостола Андрея Первозванного.